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jiangdongsunjiangdongsun

伴读书童


构建表达乙肝核心抗原的基因工程菌的方法

构建表达乙肝核心抗原的基因工程菌的方法?
基因工程菌的产物的分离纯化工艺?
谢谢,

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不懂装懂不懂装懂

饱学秀才


特邀回答的答案

你也太不努力了吧,是做课题还是申请课题?这些内容怎么像研究生开题报告或者863课题申请啊。这方面的工作甚至可以申请973项目,你这里空手套白狼啊。
不过既然看了你的问题,还是简单给你解答一下所需要的步骤:
1)到GENBANK中将乙肝核心抗原的序列拿到。
2)选择合适的表达原核体系,当然有很多,都是不同公司开发的,效果都差不多,很多时候选择也是碰运气。比如可以选择PET系列的载体。
3)根据核心抗原编码区序列设计相应的引物,两侧设计双酶切位点,用PCR方法获得目的片段。
4)将目的片段通过连接定向插入载体中,转化克隆用细菌(如JM109等),筛选目的克隆,并DNA测序鉴定。
5)将正确的克隆转化工程菌,筛选阳性克隆。
6)诱导表达。
7)纯化工艺根据你选择的载体而定,要看是否带有纯化标签(Tag),是以可溶性表达还是以包含体表达,等等。这个方面的工作应该已经有很多研究了,你可以查看一下相关的专利文件。不过要想立题,必需有和别人不一样的地方。

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  • jiangdongsunjiangdongsun

    伴读书童


    谢谢您,我大三,这是生物技术制药的题目,老师给了我们题后,让我们当作业,可是没太有头绪,提问没想当答案,只是想有点头绪,

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